通過桑果組培研究植物組培技術

來源：　類別：技術文章　更新時間：2013-01-19　閱讀次

　　桑樹是多年生木本植物，屬于落葉樹種，主要分布于溫帶和亞熱帶地區。我國果桑主要分布在江蘇、廣東、廣西、湖北、陜西等地。但規模都不大，一般每個種植地不超過33 hm²畝。現有果桑品種十幾個。從遺傳方面來講，有二倍體（2n）、三倍體（3n）、四倍體（4n）。產量2 250 kg/ hm² , 7 500~11 250 kg/ hm²、30 000 kg/ hm²。桑苗繁殖的方法很多，大體上分為有性繁殖和無性繁殖兩大類。
　　嫁接法、扦插法，一是速度慢，二是質量差，不能脫毒，且易感病毒病。近20余年，隨著生物技術的不斷完善和提高，利用組織培養快速繁殖并產生大量脫毒苗，以解決某些植物的退化，提高果實產量和質量，應用于生產，為加速培養桑樹優良品種開辟出新途徑。果桑不但桑果產量高、而且桑葉的質量、產量與湖桑（普通養蠶用桑樹）相當。因此既可發展養蠶業，又可收獲桑果。鮮桑果可以直接供應市場，也可加工成桑果汁、桑果醬、釀成桑果酒，制成桑仁糕，還可以提煉食用色素、醫用黃酮等醫藥產品。香港雜志把果桑稱謂第三代流行果品之一。
　　1 材料和方法
　　1. 1 材料的選擇和處理
　　取健壯枝條的頂芽或側芽，剪除葉片，用無菌水擦洗干凈，在無菌條件下，用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min，無菌水沖洗3~4次，將處理過的組織放入組培培養室中開始培養。
　　1.2 接種
　　在無菌條件下，將頂芽或側芽切成3~5mm長的段，剝去莖尖外部鱗片和小葉，接種到培養基上，每瓶接5~7段。
　　1. 3 培養
　　將頂芽或莖段，接種在MS + 0.5mg/L BA + 0. lmg/L NAA + 0. lmg/L GA培養基中培養，附加3%蔗糖，用0.5%瓊脂固化。在溫度25℃左右和光照下，5d后長出單生芽，4周后小芽長到1 cm并產生叢生苗。
　　將叢生苗分割接種在MS + 2mg/L BA + 0.5mg/L GA培養基中，附加蔗糖3% ,0.5%瓊脂固化。
　　經培養小苗長到3~5cm高時，可以從節間處，將其切成小段進行繼代培養，側芽萌動，迅速生長。1個月可長到3~5cm高，繼代培養可使側芽苗不斷增殖，從而獲得大量可供繁殖的試管苗。
　　切下帶頂芽的苗，插在1/2MS+1mg/L GA + 2%蔗糖的培養基上培養。約4、5周后，在自然光照下，生根發育成完整植株，供移栽。
　　3 結果與討論
　　本材料為雙子葉植物，在培養過程中，我們發現在莖段的切口特別是基部切口上會長出類似愈傷組織的褐化物，且不斷膨大，直至將底部包圍。這樣從頂芽開始逐漸枯黃、萎縮，造成培養失效。因此，建議在培養基中加入適量的活性炭等吸收劑吸附部分褐化物質，也可用頻繁轉移到新鮮培養基上或用切除褐化組織的方法加以防止，有一定效果。